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技術文章 / article
對細胞株的污染鑒定與處理解讀
原載自:www.chunqiuwuba.com[技術資料頻道] 2022-09-09 瀏覽次數:1027
細胞株的無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物品如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可暫時放置,其它實驗用品用完即應移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在抬面之中央無菌區域,勿在邊緣之非無菌區域操作。
實驗室環境的污染也會造成細胞株培養的污染,所以實驗室環境要定期進行消毒。例如試驗臺、超凈臺、培養箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細胞培養環境被支原體污染,可引起細胞的污染。應定期對工作區域進行消毒。
在細胞培養過程中,支原體感染發生率達到63%,因而細胞培養過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞株培養的老手都知道,支原體污染非常不易察覺。有的實驗室被支原體污染后,如果不進行有效*的支原體清除,該實驗的細胞培養很難進行下去,細胞傳三代以后狀態就急劇下滑,無法進行正常實驗,有的實驗室甚至只能指望換細胞間。
怎樣有效檢測并清除支原體污染呢?
支原體污染的來源包括工作環境的污染、操作者本身的污染、培養的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。細胞培養工作中,主要從控制環境污染、嚴格實驗操作、細胞培養和器材要保證無菌以及在細胞培養中加入適量的抗生素來預防支原體的污染。
如果受到支原體污染時,細胞形態較之無明顯變化,極易被忽視,往往直到污染非常嚴重時才能發現。受污染的細胞膜上可能有幾百個支原體,這些支原體競爭營養并釋放有毒的代謝產物,嚴重影響實驗結果。